PEMERIKSAAN STREPTOCOCCCUS
Hari pertama :
1. Pewarnaan Gram Original
Bahan : biakan kuman staphylococcus
Reagen : Gentian Violet
Gram’s iodine
Alcohol 95 %
Safranin 1%
Cara kerja :
a. Pemeriksaan mikroskopis dengan pengecatan Gram dari bahan pemeriksaan , preparat dibiarkan kering dan difiksasi
b. Tuangkan dengan gentian violet selama 1 menit
c. Cuci dengan air
d. Tuang dengan gram iodine selama 30 detik
e. Cuci dengan air
f. Decolourisasi dengan alcohol 95%
g. Cuci dengan air
h. Counterstain dengan safranin 1 % selama 2 menit
i. Cuci dengan air dan biarkan kering
j. Periksa dengan pembesaran mikroskop pembesaran objektif
Hasil : gram (+) coccus ( + )
2. Penanaman kuman pada media padat
Bahan : biakan kuman staphylococcus
Media : a. NAP ( nutrient agar plate )
b. BAP ( blood agar plate )
Cara kerja :
Ambil biakan kuman staphylococcus tanam pada media NAP atau BAP . inkubasi suhu 35 – 37 0C Selam 18 -24 jam
Ambil biakan kuman staphylococcus tanam pada media NAP atau BAP . inkubasi suhu 35 – 37 0C Selam 18 -24 jam
HARI KE II
3. Pengamatan morfologi koloni
| MEDIA | NAP | BAP |
| Bentuk koloni | | |
| Pigmen | | |
| Peninngian permukaan | | |
| Pinggir koloni | | |
| Karakteristik optic | | |
| Aktivitas kuman terhadap darah | | |
| No | Pengamatan koloni | Umur biakan 2 x 24 jam suhu kamar | |
| NAP | BAP | ||
| | Bentuk koloni | | |
| | Pigmen | | |
| | Peninngian permukaan | | |
| | Pinggir koloni | | |
| | Karakteristik optic | | |
| | Aktivitas kuman terhadap darah | | |
4. Tes katalase
bahan : koloni kuman bebas darah
reagen : H2O2 3-10%
cara kerja :
a. Ambil koloni kuman dari media bebas darah , letakkan pada objek gelas
b. Teteskan reagent
c. Amati terjafinya gelembung udara
Hasil : (+) terjadi gelembung udara
5. Pembuatan biakan murni
a. Dari koloni yang tumbuh pada media NAP atau BAP di buat biakan murni , dengan cara mengambil koloni terpisah , kemudian tanam pada bouillon dan buat preparat. ( untuk mengetahui apakah biakan benar2 murni
b. Inkubasi selama 35 -37 0C 10 – 30 menit
6. Tes biokimia
media : Bile esculin
manitol
laktosa
litmust milk
NaCl 6,5% ( NaCl tolerance)
cara kerja :
a. Tanamkan biakan murni pada media glukosa , manitol, dan saccarosa
b. Inkubasi selama 35 -37 0C selama 18 – 24 jam
7. Tes CAMP ( Cristie Athin Much Peterson )
( untuk D streptococcus β hemolisa)
Bahan : Biakan kuman streptococcus
Kuman standar staphylococcusaureus flazen
Control streptococcus grup B
Media : BAP
Caranya :
1. Siapkan media BAP
2. Ambil Kuman standar staphylococcus aureus flazen
3. Gores pada BAP membentuk garis tegak lurus membelah media menjadi 2 bagian
4. Kemudian ambil kuman Control streptococcus grup B membentuk garis tegak lurus
8. Tes Resistensi
Media : BAP
Bahan : Biakan Murni Streptococcus
Disk : Baci Trasin ( Untuk streptococcus β hemolisa )
Optochin (Untuk streptococcus α dan gamma hemolisa
Cara kerja :
a. Ambil kapas lidi steril
b. Celupkan dalam biakan murni
c. Peras kapas lidi dengan memutarnya pada dinding abung
d. Goreskan kapas lidi tadi pada media BAP secara merata
e. Biarkan ± 5 menit
f. Letakkan disk di tengah2 media dengan menjepit disk dengan pinset , tekan supaya disk benar benar menempel pada media
g. Inkubasi selama 35 -37 0C selama 18 – 24 jam
h. Ukur diameter zona inhibisi disk :
Tidak ada komentar:
Posting Komentar